Fa'atau mea faigaluega fa'alolo

Sili atu i le 30+ Tausaga Gaosi Mea

O le ola i le maualuga o le vevela na matauina i le in vitro ma le laser-vevela auro nanoparticles

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Thermophiles o ni meaola ninii e olaola i le vevela maualuga. O le suʻesuʻeina o i latou e mafai ona maua ai faʻamatalaga taua e uiga i le auala e faʻafetaui ai le olaga i tulaga ogaoga. Ae ui i lea, e faigata ona ausia tulaga maualuga o le vevela i microscopes mataʻutia masani. Ole tele o fofo ile fale e fa'avae ile fa'avevela eletise fa'apitonu'u ua fa'atūina, ae leai se fa'atauga faigofie. I totonu o lenei pepa, matou te faʻalauiloaina le manatu o le faʻavevelaina o le laser microscale i luga o le microscope field of view e maua ai le maualuga o le vevela mo suʻesuʻega thermophile aʻo tausia le siosiomaga o le tagata faʻaoga agamalu. E mafai ona ausia le fa'avevelaina ole microscale ile malosi ole leisa ile fa'aogaina o se mea fa'apipi'i fa'apipi'i auro e pei o se mea e fa'aola lelei ma fa'aoga malamalama. O a'afiaga e ono tutupu i le fe'avea'i o le sua mama, fa'atumauina o sela, ma le gaioi o le thermophoretic centrifugal o lo'o talanoaina. O le auala na fa'aalia i ituaiga e lua: (i) Geobacillus stearothermophilus, o se siama thermophilic malosi e toe gaosia i le tusa ma le 65 ° C, lea na matou matauina e totogo, ola ma aau i lalo o le fa'avevelaina; (ii) Thiobacillus sp., ose archaea e sili ona maualuga le hyperthermophilic. i le 80°C. O lenei galuega e saunia ai le auala mo le mataʻituina faigofie ma le saogalemu o microorganisms thermophilic e faʻaaoga ai meafaigaluega faʻaonaponei ma taugofie.
I luga o le faitau piliona o tausaga, o le olaga i luga o le fogaeleele ua suia e faʻafetaui i le tele o tulaga faʻalesiosiomaga lea e manatu i nisi taimi e sili atu i la tatou vaaiga faaletagata. Aemaise lava, o nisi microorganisms thermophilic (bacteria, archaea, fungi) e taʻua o le thermophiles e olaola i le vevela mai le 45 ° C i le 122 ° C1, 2, 3, 4. Thermophiles e ola i meaola faanatura eseese, e pei o le sami loloto, vai vevela. po o nofoaga o mauga mu. O a latou suʻesuʻega na faʻatupuina ai le tele o le fiafia i nai tausaga talu ai mo ni mafuaʻaga se lua. Muamua, e mafai ona tatou aʻoaʻoina mai ia i latou, mo se faʻataʻitaʻiga, pe faʻafefea ona mautu le thermophiles 5, 6, enzymes 7, 8 ma membranes 9 i ia vevela maualuga, poʻo le auala e mafai ai e thermophiles ona tatalia le maualuga o le vevela10. Lona lua, o latou o le faavae mo le tele o mea taua biotechnological applications1,11,12 e pei o le gaosiga o suauu13,14,15,16, chemical synthesis (dihydro, alcohols, methane, amino acids, etc.)17, biomining18 ma thermostable biocatalysts7 ,11, 13. Aemaise lava, o le polymerase chain reaction (PCR)19 ua lauiloa i le taimi nei e aofia ai se enzyme (Taq polymerase) e vavae ese mai le thermophilic bacterium Thermus aquaticus, o se tasi o uluai thermophiles na maua.
Ae ui i lea, o le suʻesuʻeina o thermophiles e le o se galuega faigofie ma e le mafai ona faʻaleleia i soʻo se fale suʻesuʻe. Aemaise lava, e le mafai ona va'aia i totonu o le vitro ia thermophiles ola i so'o se microscope malamalama masani, e o'o lava i potu fa'amafanafana avanoa fa'apisinisi, e masani ona fa'amauina mo le vevela i lalo ole 40°C. Talu mai le 1990s, na o ni nai vaega suʻesuʻe na tuʻuina atu i latou lava i le faʻaofiina o masini microscopy maualuga (HTM). I le 1994 Glukh et al. O le potu fa'avevela/malili na fa'avae i luga o le fa'aogaina o le Peltier cell e pulea le vevela o capillaries rectangular tapunia e fa'atumauina ai le anaerobicity 20 . E mafai ona vevela le masini i le 100 °C i le fua o le 2 °C / s, e mafai ai e tusitala ona suʻesuʻeina le gaogao o le siama hyperthermophilic Thermotoga maritima21. I le 1999 Horn et al. O se masini e tutusa lelei lava ua atiaeina, o loo faavae pea i luga o le faaaogaina o capillaries vevela talafeagai mo microscopy pisinisi e suesue cell vaevaega / sootaga. I le maeʻa ai o se vaitaimi umi o le le gaoioi, na toe amata le sailiga mo HTM aoga i le 2012, aemaise lava i le fesoʻotaʻiga ma se faasologa o pepa a le vaega Wirth na faʻaaogaina se masini na fatuina e Horn et al. I le sefululima tausaga talu ai, o le gaogao o se numera tele o archaea, e aofia ai hyperthermophiles, na suʻesuʻeina i le vevela e oʻo atu i le 100 ° C e faʻaaoga ai capillaries vevela23,24. Na latou suia foi le uluai microscope e maua ai le vevela vave (nii minute nai lo le 35 minute e oʻo ai i le vevela seti) ma ausia se laina laina vevela e sili atu i le 2 cm i luga o le alalaupapa. O lenei masini e fa'asolo ai le vevela (TGFD) ua fa'aaogaina e su'esu'e ai le fe'avea'i o le tele o thermophiles i totonu o le vevela gradients i le biologically talafeagai mamao 24, 25 .
O le faʻamafanafanaina o capillaries tapuni e le na o le pau lea o le auala e matau ai thermophiles ola. I le 2012, Kuwabara et al. Sa fa'aogaina potu Pyrex fa'aaoga ile fale na fa'amaufa'ailogaina ile fa'apipi'i fa'afefe vevela (Super X2; Cemedine, Iapani). O faʻataʻitaʻiga na tuʻuina i luga o se pusa faʻamafanafana manino faʻatau (Micro Heat Plate, Kitazato Corporation, Iapani) e mafai ona faʻamafanafanaina e oʻo atu i le 110 ° C, ae leʻi fuafuaina muamua mo le bioimaging. Na matauina e le au tusitala le vaevae lelei o siama thermophilic anaerobic (Thermosipho globiformans, faaluaina taimi 24 min) i le 65°C. I le 2020, Pulshen et al. O le faʻamafanafanaina lelei o ipu uʻamea faʻapisinisi (AttofluorTM, Thermofisher) na faʻaalia i le faʻaaogaina o elemene faʻamafanafana fale e lua: o se tapuni ma se tulaga (faʻapipiʻi masini PCR). O lenei mafutaga e maua ai le vevela o le sua tutusa ma puipuia ai le faʻasaʻoina ma le faʻafefe i le pito i lalo ole tapuni. O le fa'aogaina o le O-mama e 'alo ese ai le fesuia'iga o kesi ma le si'osi'omaga. O lenei HTM, e taʻua o le Sulfoscope, na faʻaaogaina e faʻatusa ai le Sulfolobus acidocaldarius ile 75°C27.
O le tapula'a o nei faiga uma o le fa'atapula'aina lea o le fa'aogaina o fa'amoemoega o le ea, so'o se suau'u fa'atofu e le talafeagai mo le maualuga o le vevela ma mo le fa'ata'ita'iga e ala i le 1-mm mafiafia fa'ata'ita'iga manino. O le tapula'a o nei faiga uma o le fa'atapula'aina lea o le fa'aogaina o fa'amoemoega o le ea, so'o se suau'u fa'atofu e le talafeagai mo le maualuga o le vevela ma mo le fa'ata'ita'iga e ala i le 1-mm mafiafia fa'ata'ita'iga manino. Общепризнанным недостатком всех этих систем было ограничение на использование воздушных объективов, посколмьбужов, посколмькужу ение в масло не подходило для такой высокой температуры и для визуализации через прозрачные образцы толщ1инмой >. O se fa'aletonu iloga o nei faiga uma o le fa'atapula'aina lea o le fa'aogaina o fa'amoemoega o le ea, talu ai so'o se fa'atofuina o le suau'u e le talafeagai mo le maualuga o le vevela ma mo le va'aia e ala i fa'ata'ita'iga manino> 1 mm mafiafia.所有这些系统的一个公认限制是限制使用空气物镜,任何油浸都不适合这样的适合这样的这合这样的合这样厚的透明样品成像。 O le fa'atapula'aina o nei faiga uma o le fa'atapula'aina lea o le fa'aogaina o se fa'ata e fa'aulu i le ea, aua so'o se fa'atofuina o le suau'u e le talafeagai mo fa'ata'ita'iga manino fa'ata'ita'iga>1 mm mafiafia i ia vevela maualuga. Общепризнанным недостатком всех этих систем является ограниченное использование воздушных объективов, лимбур масло непригодно для таких высоких температур и визуализации через прозрачные образцы толщиной >1 мм. O se fa'aletonu iloga o nei faiga uma o le fa'atapula'aina o le fa'aogaina o tioata ea, so'o se suau'u fa'atofu e le talafeagai mo ia maualuga maualuga ma va'aiga e ala i fa'ata'ita'iga manino>1 mm mafiafia.Talu ai nei lava, o lenei tapulaʻa na aveesea e Charles-Orzag et al. 28, o le na fausia se masini e le toe tuʻuina atu le vevela i luga o le faiga o tului, ae o totonu o le ufiufi tioata lava ia, ufiufi i se mea manifinifi manino o se tetee e faia i le ITO (indium-tin oxide). O le tapuni e mafai ona faʻamafanafanaina i le 75 °C e ala i le pasia o se eletise eletise i totonu o le faʻaaliga manino. Ae ui i lea, e tatau foi i le tusitala ona faʻamafanafanaina le tioata i le faʻamoemoe, ae le sili atu i le 65 °C, ina ia le faʻaleagaina.
O nei galuega o loʻo faʻaalia ai o le atinaʻeina o microscopy mataʻutia maualuga maualuga e leʻi faʻaaogaina lautele, e masani ona manaʻomia meafaigaluega fale, ma e masani ona ausia i le tau o le faʻaogaina o fanua, o se faʻafitauli matuia ona o le thermophilic microorganisms e le sili atu nai lo ni nai mea. micrometers. Faʻaitiitia le vevela vevela o le ki lea i le foia o faʻafitauli faʻapitoa e tolu o le HTM: le lelei o le faʻaogaina o le vateatea, maualuga le vevela o le vevela pe a vevela le faʻaogaina, ma le vevela leaga o elemene o loʻo siomia ai (suauʻu faatofu, tioata faʻamoemoe ... poʻo lima o le tagata faʻaoga) i le vevela vevela. ).
I totonu o lenei pepa, matou te faʻaalia se HTM mo le mataʻituina o le thermophile e le faʻavae i luga o le faʻamafanafanaina. Nai lo lena, na matou maua le fa'avevela fa'apitonu'u i totonu o se vaega fa'atapula'a o le va'aiga a le microscope e ala i le fa'avevelaina o le laser o se mea e fa'amama malamalama. O le tufatufaina o le vevela na va'aia i le fa'aogaina ole quantitative phase microscopy (QPM). O le aoga o lenei metotia o loʻo faʻaalia e Geobacillus stearothermophilus, o le motile thermophilic bacterium e toe gaosia pe a ma le 65°C ma e puupuu le taimi e faaluaina ai (pe a ma le 20 minute), ma Sulfolobus shibatae, o se hyperthermophile e tupu lelei ile 80°C (archaea) e fa'amatala. O le fua masani o le toe faia ma le aau sa matauina o se galuega o le vevela. O lenei laser HTM (LA-HTM) e le faʻatapulaʻaina i le mafiafia o le ufiufi poʻo le natura o le faʻamoemoe (ea poʻo le suauʻu faʻatofu). Ole mea lea e mafai ai ona fa'aoga so'o se tioata maualuga maualuga ile maketi. E le afaina fo'i i le fa'avevela fa'agesegese ona o le inertia vevela (e maua fa'avevela vave i luga o le fua milisecond) ma fa'aaoga na'o vaega fa'atau pisinisi. Pau lava le popolega fou o le saogalemu e feso'ota'i ma le iai o fa'alava laser malolosi (e masani lava e o'o i le 100 mW) i totonu o le masini ma atonu e ala atu i mata, lea e mana'omia ai mata tioata puipui.
O le mataupu faavae o le LA-HTM o le faʻaaogaina lea o se laser e faʻamafanafana ai le faʻataʻitaʻiga i totonu o le fanua o le vaʻaiga o le microscope (Fig. 1a). Ina ia faia lenei mea, e tatau ona mama le faʻataʻitaʻiga. Mo le faʻaogaina o le malosi o le laser talafeagai (itiiti ifo i le 100 mW), matou te leʻi faʻalagolago i le faʻaogaina o le malamalama e ala i le vai, ae faʻateleina le faʻaogaina o le faʻataʻitaʻiga e ala i le ufiufiina o le substrate i nanoparticles auro (Fig 1c). O le faʻamafanafanaina o nanoparticles auro ma le malamalama e taua tele i le fanua o plasmonics vevela, faʻatasi ai ma faʻamoemoega faʻaoga i biomedicine, nanochemistry poʻo le seleselega o le la29,30,31. I nai tausaga ua tuanaʻi, sa matou faʻaogaina lenei LA-HTM i le tele o suʻesuʻega e fesoʻotaʻi ma faʻaoga plasma vevela i le fisiki, kemisi ma le biology. O le faigata tele i lenei metotia o le faʻaalia lea o le faʻamatalaga mulimuli o le vevela, talu ai o le maualuga o le vevela e faʻatapulaʻa i se vaega microscale i totonu o le faʻataʻitaʻiga. Ua matou faʻaalia e mafai ona ausia le faʻafanua o le vevela i le fa o le galu e fa o le galu, o se auala faigofie, maualuga, ma sili ona maaleale o le microscopy vaega quantitative e faʻavae i luga o le faʻaogaina o faʻailoga faʻasolosolo e lua (faʻapitoa foʻi e taʻua o cross gratings) 33,34,35,36. O le fa'atuatuaina o lenei masini fa'amama (thermal microscopy technique), fa'avae i luga o le crossed grating wavefront microscopy (CGM), ua fa'aalia i le tele o pepa na lomia i le sefulu tausaga talu ai37,38,39,40,41,42,43.
Fuafuaga o le faʻapipiʻiina o faʻamafanafana leisa tutusa, faʻavasegaina ma le vevela microscope. b Fa'ata'ita'iga geometry e aofia ai se potu AttofluorTM o lo'o i ai se ie ufiufi fa'apipi'iina i nanoparticles auro. i Va'ai toto'a i le fa'ata'ita'iga (ae le o le fua). d o lo'o fa'atusalia ai le fa'ailoga fa'alava leisa toniga ma (e) le fa'ata'ita'iina o le tufatufaina atu o le vevela mulimuli ane i luga o le va'alele fa'ata'ita'i o nanoparticles auro. f o se fa'ailoga fa'alava fa'alava leisa e talafeagai mo le fa'atupuina o se vevela tutusa e pei ona fa'aalia i le fa'ata'ita'iga o le tufatufaina o le vevela o lo'o fa'aalia i le (g). Fua fua: 30 µm.
Aemaise lava, na matou ausia talu ai nei le faʻamafanafanaina o sela mamame ma LA-HTM ma le CGM ma siaki tali faʻateʻia vevela vevela i le va o le 37-42 ° C, faʻaalia le faʻaogaina o lenei metotia i ata ola e tasi. Ae ui i lea, o le faʻaogaina o le LA-HTM i le suʻesuʻeina o meaola ninii i le maualuga o le vevela e le faʻamaonia, aua e manaʻomia ai le faʻaeteete atili pe a faʻatusatusa i sela mamame: muamua, faʻamafanafanaina le pito i lalo ole ala ile sefulu tikeri (nai lo ni nai tikeri) taʻitaʻia. i se fa'aliliga malosi o le vevela tūsa'o. e mafai ona fa'atupu ai le fe'avea'i o le sua 44 lea, pe a le pipi'i mau i le mea fa'apipi'i, e mafai ona fa'atupu ai le fefiloi ma le fefiloi o siama. O lenei convection e mafai ona faʻaumatia e ala i le faʻaitiitia o le mafiafia o le vai. Mo lenei fa'amoemoe, i fa'ata'ita'iga uma o lo'o tu'uina atu i lalo, na tu'u ai fa'ama'i fa'ama'i i le va o ie ufiufi e lua e tusa ma le 15 µm mafiafia e tu'u i totonu o se ipu u'amea (AttofluorTM, Thermofisher, Fig. 1b,c). I le mataupu faavae, e mafai ona aloese mai le convection pe afai o le mafiafia o le vai e laʻititi nai lo le lapoʻa lapoʻa o leisa vevela. Lona lua, o le galue i se fa'afanua fa'atapula'a e mafai ona fa'amalo ai meaola fa'aola (silasila i le Ata S2). E mafai ona aloese mai lenei fa'afitauli e ala i le fa'aogaina o se mea e fa'afefeteina i le okesene (po'o so'o se isi kasa taua), e ala i le tu'u o pupuni o le ea o lo'o pu'eina i totonu o le ufiufi, po'o le viliina o pu i le pito i luga o le ufiufi (silasila i le Ata S1) 45 . I lenei suʻesuʻega, na matou filifilia le fofo mulimuli (Ata 1b ma le S1). Ma le mea mulimuli, e le maua ai e le fa'avevela leisa le tufatufaina tutusa o le vevela. E oo lava i le malosi tutusa o le laisa laser (Fig. 1d), o le tufatufaina o le vevela e le tutusa, ae e foliga tutusa ma le tufatufaina o Gaussian ona o le vevela vevela (Fig. 1e). Afai o le sini o le faʻavaeina saʻo o le vevela i totonu o le vaʻaiga mo le suʻesuʻeina o faiga faʻapitoa, o faʻamatalaga le tutusa e le lelei ma e mafai foi ona taʻitaʻia ai le thermophoretic o siama pe a latou le pipii i le substrate (silasila i le Ata S3, S4)39. I lenei tulaga, na matou faʻaaogaina se faʻaogaina o le malamalama faʻapitoa (SLM) e faʻapipiʻi ai le laser infrared beam e tusa ai ma le foliga o le mama (Fig. 1f) i le vaalele o le faʻataʻitaʻiga e ausia ai le tufatufaina atu o le vevela atoatoa i totonu o se vaega faʻafanua tuʻufaʻatasia, e ui lava ina fa'asalalauina vevela (Ata. 1d) 39 , 42, 46. Tuu se ie ufiufi pito i luga i luga o se ipu u'amea (Ata 1b) e aloese ai mai le fa'asao o le ala ma va'ai mo ni nai aso. Talu ai e le'i fa'amaufa'ailogaina lenei ie pito i luga, e mafai ona faigofie ona fa'aopoopo i so'o se taimi pe a mana'omia.
Ina ia faʻaalia le auala e galue ai LA-HTM ma faʻaalia lona faʻaogaina i suʻesuʻega thermophilic, na matou suʻesuʻeina le siama aerobic Geobacillus stearothermophilus, o loʻo i ai le maualuga o le vevela o le tuputupu aʻe e tusa ma le 60-65°C. O le siama e iai foʻi fuʻa ma le malosi e aau, e maua ai se isi faʻaaliga o gaioiga masani feaveaʻi.
Faʻataʻitaʻiga (Fig. 1b) na muaʻi faʻapipiʻiina i le 60 ° C mo le itula e tasi ona tuʻu lea i totonu o se laʻau faʻataʻitaʻiga LA-HTM. O lenei mua'i incubation e filifili, ae aoga pea, mo mafuaaga e lua: Muamua, pe a ki le laser, e mafua ai ona vave tuputupu ae sela ma vaeluaina (vaai ata tifaga M1 i Mea Faaopoopo). A aunoa ma le fa'ao'o muamua, e masani lava ona tuai le tupu a'e o siama e tusa ma le 40 minute i taimi uma e fa'avevela ai se nofoaga fou e matamata ai i luga o le fa'ata'ita'iga. Lona lua, o le 1 itula a'o le'i incubation na fa'aolaina ai le pipii o siama i le ie ufiufi, puipuia ai sela mai le tafe ese mai le va'aiga ona o le thermophoresis ina ua ki le laser (silasila i le ata M2 i Mea Fa'aopoopo). Thermophoresis o le fegasoloaʻi lea o mea ninii poʻo molelaʻau i luga o le vevela gradient, masani mai le vevela i le malulu, ma siama e leai se tuusaunoaga43,47. O lenei a'afiaga e le mana'omia e fa'aumatia i luga o se vaega tu'uina atu e ala i le fa'aogaina o le SLM e fa'atusa ai le laisa leisa ma maua ai le tufatufaina o le vevela mafolafola.
I luga o le fig. O le ata 2 o loʻo faʻaalia ai le tufatufaina o le vevela e fuaina e le CGM na maua e ala i le faʻafefeina o se mea tioata faʻapipiʻiina i nanoparticles auro faʻatasi ai ma se laisa laser annular (Fig. 1f). Sa matauina le tufatufaina o le vevela mafolafola i luga o le vaega atoa o loʻo ufiufi e le laser beam. O lenei sone na seti i le 65 ° C, o le vevela sili ona lelei o le tuputupu aʻe. I fafo atu o lenei itulagi, o le fua o le vevela e masani lava ona pa'ū i le \(1/r\) (lea o le \(r\) o le radial coordinate).
o se faafanua vevela o fua CGM maua e ala i le faaaogaina o se laau laser annular e faasusuluina se vaega o nanoparticles auro e maua ai se talaaga vevela mafolafola i luga o se vaega lapotopoto. e Isotherm o le faafanua vevela (a). O le fa'asologa o le laisa leisa o lo'o fa'atusalia e se li'o togitogi lanu efuefu. Na toe fai faalua le faʻataʻitaʻiga (silasila i Mea Faʻaopoopo, Ata S4).
O le faʻaogaina o siama siama na mataʻituina mo ni nai itula e faʻaaoga ai le LA-HTM. I luga o le fig. O le 3 o loʻo faʻaalia ai le va o taimi mo ata e fa na puʻeina mai se ata tifaga 3 itula 20 minute (Movie M3, Faʻamatalaga Faaopoopo). Na maitauina le fa'ateleina o siama i totonu o le vaega lapotopoto ua fa'amatalaina e le laser lea e sili ona lelei le vevela, e latalata i le 65°C. I se faʻatusatusaga, o le tuputupu aʻe o sela na matua faʻaitiitia pe a pa'ū le vevela i lalo ole 50°C mo le 10 s.
O ata loloto o mata o siama G. stearothermophilus o loʻo tupu pe a uma le faʻamafanafanaina o le laser i taimi eseese, (a) t = 0 min, (b) 1 h 10 min, (c) 2 h 20 min, (d) 3 h 20 min, out of 200 Aveese mai se ata e tasi le minute (M3 ata o loʻo tuʻuina atu i Faʻamatalaga Faʻaopoopo) faʻapipiʻi i luga o le faʻafanua o le vevela tutusa. E ki le laser i le taimi \(t=0\). Isotherms ua faaopoopo i le ata malosi.
Ina ia fa'atatau atili le tuputupu a'e o le sela ma lona fa'alagolago i le vevela, matou te fuaina le fa'atuputeleina o le biomass o kolone eseese o siama fa'ato'a muamua i totonu o le ata tifaga M3 (Fig. 4). Ole siama matua na filifilia ile amataga ole fa'avaeina ole vaega ole la'ititi (mCFU) o lo'o fa'aalia ile Ata S6. O fua fa'amamago na faia i le CGM 48 mea pu'eata na fa'aaoga e fa'afanua ai le tufatufaina o le vevela. Ole gafatia ole CGM e fuaina le mamafa matutu ma le vevela ole malosi ole LA-HTM. E pei ona fa'amoemoeina, o le maualuga o le vevela na mafua ai ona vave tupu fa'ama'i (Ata 4a). E pei ona faʻaalia i le semi-log plot i le Ata 4b, o le tuputupu aʻe i vevela uma e mulimuli i le faʻatupulaia o le faʻateleina, lea e faʻaogaina ai e faʻamaumauga le galuega faʻapitoa \(m={m}_{0}{10}^{t/\ tau }+ {{ \mbox{cst}}}\), lea \(\tau {{{{{\rm{log }}}}}}}2\) – taimi fa'atuputupulaga (po'o taimi fa'aluaina), \( g =1/ \tau\) – fua faatatau o le tuputupu aʻe (numera o vaevaega i le iunite taimi ). I luga o le fig. O le 4c o loʻo faʻaalia ai le fua faatatau o le tuputupu aʻe ma le taimi o le gaosiga o se galuega o le vevela. O mCFU fa'aola vave o lo'o fa'aalia i le saturation o le tuputupu a'e pe a mae'a le lua itula, o se amio fa'amoemoe ona o le maualuga o siama (e tutusa ma le tulaga tumau i tu ma aga masani vai). Ole foliga lautele \(g\left(T\right)\) (Fig. 4c) e fetaui ma le fa'amoemoega lua-vaega curve mo G. stearothermophilus ma se fua faatatau tuputupu aʻe sili ona lelei ile 60-65°C. Fa'afetaui fa'amaumauga e fa'aaoga ai se fa'ata'ita'iga autu (Ata S5)49 lea \(\left({{G}_{0}{;\;T}}_{{\min }};{T}_{{opt} } ;{T}_{{\max}}\right)\) = (0.70 ± 0.2; 40 ± 4; 65 ± 1.6; 67 ± 3) °C, lea e fetaui lelei ma isi tulaga taua o loo taʻua i tusitusiga49. E ui lava e mafai ona toe gaosia le fua fa'atatau o le vevela, o le fua maualuga o le tuputupu a'e o le \({G}_{0}\) e ono fesuisuia'i mai le tasi fa'ata'ita'iga i le isi (silasila i fuainumera S7-S9 ma le ata M4). I le faʻatusatusaina o le faʻaogaina o le vevela, e tatau ona lautele, o le maualuga o le tuputupu aʻe e faʻalagolago i meatotino o le ala (avanoa o meaʻai, faʻaogaina o le okesene) i totonu o le microscale geometry.
a Microbial tuputupu ae i vevela eseese. mCFU: Laiti Vaega Fa'avae. Fa'amatalaga na maua mai se vitio o se siama e tasi o lo'o tuputupu a'e ile fa'alili ole vevela (tiea M3). e tutusa ma le (a), fua semi-logarithmic. c Fa'atatau o le tuputupu a'e\(\tau\) ma le taimi o le fa'atupuina\(g\) fa'atatau mai le fa'asologa o laina (b). Pa'u fa'aletonu fa'asaga i luga: va'aiga o le vevela lea na fa'alautele ai mCFUs i le va'aiga a'o tuputupu a'e. Tu'usa'o fa'amau fa'aletonu: laina fa'asologa fa'asologa fa'aletonu.
E fa'aopoopo i le tuputupu a'e masani, o nisi o siama e opeopea i le va'aiga a'o fa'avevela leisa, o se uiga fa'amoemoeina mo siama e iai le fu'a. O le ata M5 i faʻamatalaga faaopoopo o loʻo faʻaalia ai ia gaoioiga aau. I lenei fa'ata'ita'iga, na fa'aogaina ai le fa'avevela leisa tutusa e fa'atupu ai le fa'alili o le vevela, e pei ona fa'aalia i Ata 1d, e ma le S3. O le Ata 5 o lo'o fa'aalia ai fa'asologa o ata e lua na filifilia mai le ata M5 o lo'o fa'aalia ai e tasi le siama o lo'o fa'aalia le fa'atonuga a'o isi siama uma e tumau pea le gaioi.
O faavaa taimi e lua (a) ma le (b) o loʻo faʻaalia ai le aau o siama eseese e lua ua makaina i liʻo togitogi. O ata na aumai mai le ata tifaga M5 (tuuina atu o mea faaopoopo).
I le tulaga o G. stearothermophilus, o le gaioiga malosi o siama (Ata. 5) na amata i ni nai sekone talu ona ki le laisa leisa. O lenei faʻamatalaga e faʻamamafa ai le tali atu i le tino o lenei microorganism thermophilic i le faʻateleina o le vevela, e pei ona matauina e Mora et al. 24 . O le autu o le siama siama ma e oʻo lava i le thermotaxis e mafai ona suʻesuʻeina atili ile LA-HTM.
E le tatau ona fenumiai le aau microbial ma isi ituaiga o gaioioiga faaletino, e pei o (i) Gaio Brown, lea e foliga mai o se gaio vevesi e aunoa ma se itu mautinoa, (ii) convection 50 ma le thermophoresis 43, e aofia ai le tafega masani i luga o le vevela. gradient.
O le G. stearothermophilus e lauiloa ona o lona gafatia e gaosia ai spores e sili ona tete'e (spore formation) pe a fa'aalia i tulaga leaga o le siosiomaga e fai ma puipuiga. A toe lelei tulaga o le si'osi'omaga, e tupu a'e le spore, e fai ai sela ola ma toe amata ai le tuputupu a'e. E ui ina iloa lelei lenei faiga o le sporulation/germination, e le'i matauina lava i le taimi moni. I le faʻaaogaina o le LA-HTM, matou te lipotia iinei le matauina muamua o mea na tutupu i le G. stearothermophilus.
I luga o le fig. O le 6a o loʻo faʻaalia ai ata faʻasolosolo o le loloto opitika (OT) maua mai le faʻaaogaina o se seti CGM o 13 spores. Mo le taimi atoa o le aoina (15 h 6 min, \(t=0\) – le amataga o le fa'avevela leisa), 4 mai le 13 spores na fa'atupuina, i taimi fa'asolosolo \(t=2\) h, \( 3\ ) h \(10 \)', \(9\) h \(40\)' ma le \(11\) h \(30\)'. E ui lava e naʻo le tasi o nei mea na tutupu o loʻo faʻaalia i le Ata 6, 4 germination mea tutupu e mafai ona matauina i le ata M6 i mea faaopoopo. O le mea e malie ai, o le germination e foliga mai e faʻafuaseʻi: e le o mea uma e tupu ma e le tupu i le taimi e tasi, e ui lava i suiga tutusa i tulaga o le siosiomaga.
a Taimi-taimi e aofia ai ata OT 8 (faatofu suau'u, 60x, 1.25 NA sini) ma le (b) biomass evolution o G. stearothermophilus aggregates. c (b) Tusia i luga o se fua semi-log e fa'ailoa ai le fa'asologa o le fua o le tuputupu a'e (laina laina).
I luga o le fig. 6b,c o loʻo faʻaalia ai le biomass o le faitau aofaʻi o tagata i le vaʻaiga o se galuega o le taimi i luga o le vaitaimi atoa o le aoina o faʻamaumauga. O le vave pala o le paisa mago na matauina i le \(t=5\)h i le fig. 6b, c, ona o le alu ese o nisi sela mai le vaaiga. Ole fua ole faatupulaia o nei mea e fa o le \(0.77\pm 0.1\) h-1. O lenei tau e maualuga atu nai lo le tuputupu ae o loʻo fesoʻotaʻi ma le Ata 3. 3 ma le 4, lea e tupu ai sela masani. O le mafuaʻaga o le faʻateleina o le tuputupu aʻe o le G. stearothermophilus mai spores e le o manino, ae o nei fuataga e faʻamaonia ai le fiafia o le LA-HTM ma galue i le tulaga tasi cell (poʻo i le mCFU tulaga tasi) e aʻoaʻo atili ai e uiga i le malosi o le ola sela. .
Ina ia faʻaalia atili le faʻaogaina o le LA-HTM ma lona faʻatinoga i le maualuga o le vevela, na matou suʻesuʻeina le tuputupu aʻe o Sulfolobus shibatae, o se hyperthermophilic acidophilic archaea ma le maualuga o le vevela o le tuputupu aʻe o le 80 ° C51. Pe a faatusatusa i le G. stearothermophilus, o nei archaea foi e matua ese lava le morphology, e pei o le 1 micron spheres (cocci) nai lo laʻau uumi (bacilli).
Ata 7a o lo'o i ai fa'asologa o ata loloto opitika o S. shibatae mCFU na maua mai le fa'aaogaina o le CGM (silasila i le ata tifaga M7 i Mea Fa'aopoopo). O lenei mCFU e tupu ile 73°C, i lalo ifo o le vevela sili ona lelei o le 80°C, ae i totonu ole lavelave mo le tuputupu ae malosi. Na matou matauina le tele o mea na tutupu i le fission na foliga mai ai mCFUs pei o micrograpes o archaea ina ua mavae ni nai itula. Mai nei ata OT, mCFU biomass na fuaina i le taimi ma tuʻuina atu i le Ata 7b. O le mea e malie ai, o le S. shibate mCFUs na faʻaalia le faʻatupulaia o laina nai lo le faʻateleina o le faʻatupulaia o loʻo vaʻaia ma G. stearothermophilus mCFUs. Ua leva ona i ai se talanoaga 52 e uiga i le natura o fua faatatau o le tuputupu aʻe o sela: a o nisi suʻesuʻega o loʻo lipotia ai le tuputupu aʻe o microbes e faʻatatau i lo latou lapopoa (faʻateleina le tuputupu ae), o isi o loʻo faʻaalia se fua faatatau faifaipea (linear or bilinear growth). E pei ona faʻamatalaina e Tzur et al.53, o le vaʻaia o le faʻalauteleina ma le (bi) faʻatupulaia laina e manaʻomia ai le saʻo o le <6% i fua o le biomass, lea e le mafai ona ausia mo le tele o metotia QPM, e oʻo lava i le aofia ai o le interferometry. E pei ona faʻamatalaina e Tzur et al.53, o le vaʻaia o le faʻalauteleina ma le (bi) faʻatupulaia laina e manaʻomia ai le saʻo o le <6% i fua o le biomass, lea e le mafai ona ausia mo le tele o metotia QPM, e oʻo lava i le aofia ai o le interferometry. Как объяснили Цур и др.53, различение экспоненциального и (би)линейного роста требует точности <6% в измеистим для большинства методов QPM, даже с использованием интерферометрии. E pei ona faʻamatalaina e Zur et al.53, o le vaʻavaʻai i le va o le faʻateleina ma le (bi) faʻatupulaia laina e manaʻomia ai le <6% saʻo i fua o le biomass, lea e le mafai ona maua mo le tele o metotia QPM, e oʻo lava i le faʻaogaina o le interferometry.E pei ona faamatalaina e Zur et al. 53, o le fa'aeseesega i le va o le fa'ateleina ma le (bi) fa'atupulaia laina e mana'omia le itiiti ifo i le 6% le sa'o i fua fa'atatau o le biomass, lea e le mafai ona maua mo le tele o metotia QPM, e tusa lava pe fa'aoga interferometry. E ausia e le CGM lea sa'o ma le sa'o o le sub-pg ile fua ole biomass36,48.
a Taimi-taimi e aofia ai ata OT 6 (faatofu suauu, 60x, NA faamoemoega 1.25) ma (b) micro-CFU biomass evolusione fuaina i le CGM. Va'ai ata M7 mo nisi fa'amatalaga.
O le tuputupu aʻe atoatoa o le S. shibate e leʻi faʻamoemoeina ma e leʻi lipotia mai. Ae ui i lea, e faʻamoemoeina le tuputupu aʻe faʻateleina, a itiiti mai ona o le aluga o taimi, e tele vaevaega o 2, 4, 8, 16 ... e tatau ona tupu. Na matou fa'apea e fa'apea o le tuputupu a'e laina e mafua ona o le taofiofia o sela ona o le mafiafia o le teuina o sela, e pei lava ona fa'agesegese le tuputupu a'e o sela ma iu ai ina o'o atu i se tulaga moe pe a maualuga tele le tele o sela.
Matou te faaiuina e ala i le talanoaina o mea nei e lima e fiafia i ai i le faasologa: faʻaitiitia o le vevela vevela, faʻaitiitia o le vevela vevela, fiafia i nanoparticles auro, fiafia i le microscopy vaega quantitative, ma se fua vevela e mafai ona faʻaaogaina LA-HTM.
Fa'atusatusa i le fa'avevela fa'asao, fa'avevela leisa fa'aaogaina mo le atina'eina o le HTM e ofoina atu le tele o mea lelei, lea matou te fa'ata'ita'iina i lenei su'esu'ega. Aemaise lava, i le faʻasalalauga vai i totonu o le vaʻaiga o le microscope, o le vevela vevela o loʻo teuina i totonu o ni nai (10 μm) 3 voluma. I lenei auala, e naʻo microbes o loʻo matauina o loʻo ola, ae o isi siama e moe ma e mafai ona faʻaoga e suʻesuʻe atili ai le faʻataʻitaʻiga - e le manaʻomia le suia o le faʻataʻitaʻiga i taimi uma e manaʻomia ai le siakiina o se vevela fou. E le gata i lea, o le faʻavevelaina o le microscale e mafai ai ona suʻesuʻeina tuusaʻo le tele o le vevela: Ata 4c na maua mai se ata tifaga 3-itula (Movie M3), lea e masani ona manaʻomia ai le sauniuni ma le suʻesuʻeina o le tele o faʻataʻitaʻiga - tasi mo faʻataʻitaʻiga taʻitasi o loʻo suʻesuʻeina. y o le vevela e fa'atusalia ai le aofa'i o aso i le su'ega. O le fa'aitiitia o le voluma vevela o lo'o taofia uma ai vaega opitika o le microscope, aemaise o le tioata fa'amoemoe, i le vevela o le potu, lea o se fa'afitauli tele o lo'o feagai ma tagata lautele i le taimi nei. LA-HTM e mafai ona faʻaogaina i soʻo se tioata, e aofia ai tioata faʻaofuofu suauʻu, ma o le a tumau i le vevela o le potu e oʻo lava i le vevela tele i le vaʻaiga. Ole tapula'a autu ole auala fa'avevela leisa lea tatou te lipotia i lenei su'esu'ega o sela e le pipii pe fa'afefete atonu e mamao mai le va'aiga ma faigata ona su'esu'e. O se fofo e mafai ona fa'aaogaina tioata fa'amatagofie e maua ai se si'itaga tele o le vevela e sili atu i nai selau microns. O lenei lapataiga e faʻatasi ma le faʻaitiitia o le faʻaogaina o avanoa, ae afai o le sini o le suʻesuʻeina o le gaioiga o microorganisms, e le manaʻomia le maualuga o le faʻafanua.
Ole fua ole taimi mo le fa'avevela (ma le fa'alili) o le faiga \({{{{{\rm{\tau}}}}}}}}}_{{{\mbox{D}}}}\) e fa'alagolago i lona tele, e tusa ai ma le tulafono \({{{({\rm{\tau }}}}}}}}_{{{\mbox{D}}}}={L}^{2}/D\), lea \ (L \ ) o le uiga tele o le puna vevela (o le lautele o le leisa beam i la tatou suʻesuʻega o le \ (L \ e uiga i 100 \) μm), \ (D \) o le diffusivity vevela o le siosiomaga (averesi i lo tatou pusa, tioata ma vai Fuafua fa'asalalau\(D\ pe tusa ma le 2\fold {10}^{-7}\) m2/s O lea la, i lenei su'esu'ega, taimi tali o le fa'atonuga o le 50 ms, o lona uiga, e pei o le taimi vave). suiga o le vevela, e mafai ona fa'amoemoeina O lenei fa'atupu vave o le si'itia o le vevela e le gata ina fa'apu'upu'u le umi o le fa'ata'ita'iga, ae fa'ataga ai fo'i taimi sa'o \(t=0\) mo so'o se su'esu'ega malosi o a'afiaga o le vevela.
O la matou metotia fa'atulagaina e fa'atatau i so'o se mea e fa'asusu ai le malamalama (mo se fa'ata'ita'iga, fa'ata'ita'iga fa'apisinisi ma fa'apalapala ITO). Ae ui i lea, o nanoparticles auro e mafai ona tuʻuina atu le maualuga o le absorption i le infrared ma le maualalo o le absorption i le vaʻaia vaʻaia, o uiga mulimuli ia e fiafia i ai mo le mataʻituina lelei o mata i le vaʻaia vaʻaia, aemaise lava pe a faʻaaogaina le fluorescence. E le gata i lea, o le auro e biocompatible, chemically inert, optical density e mafai ona fetuutuunai mai le 530 nm e latalata ile infrared, ma o sauniuniga faʻataʻitaʻiga e faigofie ma taugofie29.
Transverse grating wavefront microscopy (CGM) e fa'atagaina e le gata i le fa'afanua o le vevela i le microscale, ae fa'apea fo'i le mata'ituina o le biomass, e fa'apitoa ai le aoga (pe a le mana'omia) fa'atasi ma LA-HTM. I le sefulu tausaga ua tuanaʻi, ua atiaʻe isi metotia faʻataʻitaʻi o le vevela, aemaise lava i le tulaga o le bioimaging, ma o le tele o ia mea e manaʻomia ai le faʻaogaina o suʻesuʻega faʻafefete-maaleale54,55. Ae ui i lea, o nei metotia ua faitioina ma o nisi lipoti ua fuaina suiga le talafeagai o le vevela i totonu o sela, masalo ona o le mea moni o le fluorescence e faalagolago i le tele o mea e ese mai le vevela. E le gata i lea, o le tele o su'esu'ega felanulanua'i e le mautu i le vevela maualuga. O le mea lea, o le QPM ma fa'apitoa le CGM o lo'o fa'atusalia ai se metotia fa'ata'ita'i o le vevela lelei mo le su'esu'eina o le olaga i le maualuga o le vevela e fa'aaoga ai le masini fa'apitoa.
O suʻesuʻega a S. shibatae, e ola lelei i le 80 ° C, o loʻo faʻaalia ai e mafai ona faʻaogaina le LA-HTM e suʻesuʻe ai hyperthermophiles, ae le naʻo thermophiles faigofie. I le mataupu faavae, e leai se tapulaʻa i le tele o vevela e mafai ona oʻo i le faʻaaogaina o le LA-HTM, ma e oʻo lava i le vevela i luga aʻe o le 100 ° C e mafai ona oʻo i le mamafa o le ea e aunoa ma le faʻafefe, e pei ona faʻaalia e la matou vaega o le 38 i le hydrothermal chemistry applications i le ea. mamafa A. E faʻaaogaina le laser mo le faʻamafanafanaina o nanoparticles auro 40 i le auala lava e tasi. O le mea lea, LA-HTM e mafai ona faʻaaogaina e mataʻituina ai hyperthermophiles e leʻi tupu muamua ma faʻataʻitaʻiga maualuga faʻataʻitaʻiga opitika microscopy i lalo o tulaga masani (faʻataʻitaʻiga i lalo o le faʻafitauli o le siosiomaga).
O faʻataʻitaʻiga uma na faia e faʻaaoga ai se microscope fale, e aofia ai Köhler illumination (faʻatasi ai ma le LED, M625L3, Thorlabs, 700 mW), faʻataʻitaʻiga o loʻo umia faʻatasi ma le xy movement, sini (Olympus, 60x, 0.7 NA, ea, LUCPlanFLN60X poʻo le 60x, 1.25 NA, Suauʻu. , UPLFLN60XOI), CGM mea pueata (QLSI cross grating, 39 µm pitch, 0.87 mm mai Andor Zyla mea pueata sensor) e maua ai le malosi ma wavefront imaging, ma sCMOS mea pueata (ORCA Flash 4.0 V3, 16-bit mode , mai Hamamatsu) e faamaumauina le fa'amatalaga o lo'o fa'aalia i le Ata 5 (a'au siama). O le dichroic beam splitter o se 749 nm BrightLine pito (Semrock, FF749-SDi01). O le faamama i le pito i luma o le mea pueata o le 694 short pass filter (FF02-694 / SP-25, Semrock). Titanium leisa safaira (Laser Verdi G10, 532 nm, 10 W, pamu le galu leisa lua, Spectra-Physics i le Fig. 2-5, toe suia e le Millenia leisa, Spectraphysics 10 W, pamu Mira leisa lua, Coherent, mo Ata 2. -5). 6 ma le 7) o lo'o fa'atulagaina i le umi o le galu \({{{({\rm {\lambda }}}}}}}=800\) nm, lea e fetaui ma le plasmon resonance spectrum o auro nanoparticles. 1152 pixels) na faʻatau mai Meadowlark Optics O holograms na faʻaogaina e faʻaaoga ai le Gerchberg-Saxton algorithm e pei ona faʻamatalaina i le 39.
O le fa'a'ala'au fa'a'ala'au fa'alava (CGM) ose metotia fa'ata'ita'i fa'atatau i le tu'ufa'atasia o le fa'a'ese'esega fa'a-lua-ituaiga (lea e ta'ua o le fa'alava fa'alava) i le mamao e tasi le milimita mai le masini pu'eata masani. O le faʻataʻitaʻiga sili ona taatele o se CGM na matou faʻaogaina i lenei suʻesuʻega e taʻua o le fa-wavelength transverse shift interferometer (QLSI), lea o le koluse faʻapipiʻi e aofia ai le malosi / faʻasologa o siaki laupapa faʻalauiloa ma pateni e Primot et al. i le 200034. O laina fa'alava ma fa'alava fa'alava e fausia ai ata e pei o le grid i luga o le masini, o le fa'alavelave e mafai ona fa'agasolo fa'anumeraina i le taimi moni e maua ai le fa'asesega o le wavefront opitika (po'o fa'ata'ita'iga vaega tutusa) o le malamalama na tupu. A fa'aogaina i luga o se microscope, e mafai e se mea pu'eata CGM ona fa'aalia le eseesega o auala fa'apitoa o se mea fa'atusa, e ta'ua fo'i o le loloto opitika (OT), fa'atasi ai ma se lagona i le fa'atonuga o nanometers36. I so'o se fua CGM, ina ia fa'aumatia so'o se fa'aletonu i vaega opitika po'o fa'alava, e tatau ona ave ma to'ese mai so'o se ata mulimuli ane.
Sa faia le su'esu'ega o le vevela e fa'aaoga ai se mea pu'eata CGM e pei ona fa'amatalaina i le fa'asinomaga. 32. I se faapuupuuga, o le fa'avevelaina o se vai e suia ai lona fa'asinomaga fa'asolosolo, fa'atupuina se a'afiaga o tioata vevela e fa'alavelave ai le ave fa'alavelave. O lenei faʻalavelave faʻafefe o loʻo fuaina e le CGM ma faʻaogaina e faʻaaoga ai se algorithm deconvolution e maua ai le tufatufaina o le vevela e tolu-dimensional i le ala vai. Afai e tufatufa tutusa nanoparticles auro i totonu o le faʻataʻitaʻiga, e mafai ona faia faʻafanua vevela i nofoaga e leai ni siama e maua ai ata sili atu, o le mea lea tatou te faia i nisi taimi. O le faʻamatalaga CGM ata na maua e aunoa ma le faʻamafanafanaina (faʻatasi ai ma le laser) ma mulimuli ane puʻeina i le nofoaga e tasi i le ata ma le laser i luga.
E maua le fua fa'amamago e fa'aaoga ai le meapueata CGM tutusa e fa'aoga mo ata vevela. O ata o faʻamatalaga CGM na maua e ala i le vave faʻanofoina o le faʻataʻitaʻiga i le x ma le y i le taimi o le faʻaalia o se auala e faʻatauvaʻa ai soʻo se le tutusa i le OT ona o le i ai o siama. Mai ata OT o siama, o latou biomass na maua mai le faʻaogaina o ata i luga o vaega na filifilia e faʻaaoga ai le Matlab's homemade segmentation algorithm (silasila i le vaega "Numerical code"), mulimuli i le faʻatinoga o loʻo faʻamatalaina i le ref. 48. I se faapuupuuga, tatou te faaaogaina le sootaga \(m={\alpha}^{-1}\iint {{\mbox{OT}}}\left(x,y\right){{\mbox{d}} } x{{\mbox{d}}}y\), o le \({{\mbox{OT}}}\left(x,y\right)\) o le ata loloto opitika, \(m\) o le o le mamafa mago ma \({{{{\rm{\alpha }}}}}}}\) o se tumau. Na matou filifilia \({{{{\rm{\alpha))))))=0.18\) µm3/pg, o se fa'atumauina masani mo sela ola.
O se fa'ase'e ufiufi e 25 mm le lautele ma le 150 µm mafiafia o lo'o fa'apipi'iina i nanoparticles auro na tu'uina i totonu o se potu AttofluorTM (Thermofisher) fa'atasi ai ma nanoparticles auro e fa'asaga i luga. Geobacillus stearothermophilus na mua'i fa'atupuina i le po i le LB medium (200 rpm, 60°C) a'o le'i faia aso ta'itasi. O se mataua o le 5 µl o se faʻamalologa o le G. stearothermophilus faʻatasi ai ma le mataʻutia opitika (OD) o le 0.3 i le 0.5 na tuʻuina i luga o se laupepa faʻapipiʻi ma nanoparticles auro. Ma, o se paʻu tapuni lapotopoto 18 mm le lautele ma se pu 5 mm le lautele i le ogatotonu na pa'ū i luga o le mataua, ma 5 μl o siama faʻamaʻi faʻatasi ma le mamafa mataʻutia tutusa na faʻaaogaina pea i le ogatotonu o le pu. O vaieli i luga o ie ufiufi sa saunia e tusa ai ma le faiga o loʻo faʻamatalaina i le ref. 45 (silasila Fa'amatalaga Faaopoopo mo nisi fa'amatalaga). Ona fa'aopopo lea o le 1 ml o le LB medium i le ie ufiufi e taofia ai le fa'amago o le vai. O le ie ufiufi mulimuli e tu'u i luga o le tapuni tapuni o le Attofluor™ potu e taofia ai le fa'asao o le ala i le taimi o le fa'afefe. Mo faʻataʻitaʻiga germination, matou te faʻaaogaina spores, lea, pe a maeʻa faʻataʻitaʻiga masani, o nisi taimi e ufiufi ai le ufiufi pito i luga. Sa fa'aogaina se auala fa'apena e maua mai ai Sulfolobus shibatae. E tolu aso (200 rpm, 75°C) o le fa'ato'aga muamua o le Thiobacillus serrata na fa'atinoina i le vaeluagalemu 182 (DSMZ).
O fa'ata'ita'iga o nanoparticles auro na saunia e le micellar block copolymer lithography. O lenei faagasologa o loo faamatalaina auiliili i le Chap. 60. Fa'apuupuu, micelles encapsulating ions auro na fa'afefiloi e ala i le fa'afefiloi o le copolymer ma le HAuCl4 i toluene. Ona faatofuina lea o ie ufiufi i le vaifofo ma togafitia i le irradiation o le UV i le i ai o se mea e faʻaitiitia ai le mea e maua ai fatu auro. Mulimuli ane, na tupu fatu auro e ala i le faʻafesoʻotaʻi o se ufiufi faʻatasi ma se vaifofo vai o le KAuCl4 ma le ethanolamine mo le 16 minute, lea na iʻu ai i se faʻatulagaga quasi-periodic ma matua tutusa o nanoparticles auro e le faʻaogaina i totonu ole infrared latalata.
Ina ia liliu le interferograms i ata OT, matou te faʻaogaina se algorithm fale, e pei ona auiliiliina i le sootaga. 33 ma o loʻo avanoa e avea o se pusa Matlab i le fale teu oloa lautele: https://github.com/baffou/CGMprocess. E mafai e le afifi ona fa'atatau le malosi ma ata OT fa'avae i luga o fa'amaumauga fa'amauina (e aofia ai ata fa'asino) ma le mamao o mea pu'eata.
Ina ia faʻatusatusa le faʻasologa o vaega e faʻaaogaina i le SLM e maua ai se faʻamatalaga o le vevela, na matou faʻaaogaina se algorithm39,42 na fausia muamua i le fale lea e maua i le faleoloa lautele nei: https://github.com/baffou/SLM_temperatureShaping. O le mea e tu'uina atu o le fanua vevela e mana'omia, lea e mafai ona fa'atulaga fa'atekinolosi pe ala i se ata monochrome bmp.
Ina ia vaelua sela ma fua lo latou mamafa mago, matou faʻaaogaina la matou Matlab algorithm lomia i le faleteuoloa lautele nei: https://github.com/baffou/CGM_magicWandSegmentation. I luga o ata taʻitasi, e tatau i le tagata faʻaoga ona kiliki i luga o siama poʻo le mCFU o tului, fetuunai le lagona o le wand, ma faʻamaonia le filifiliga.
Mo nisi faʻamatalaga e uiga i suʻesuʻega suʻesuʻega, vaʻai i le Nature Research Report faʻamatalaga e fesoʻotaʻi ma lenei tusiga.
O fa'amaumauga e lagolagoina ai fa'ai'uga o lenei su'esu'ega e maua mai i tusitala ta'itasi i luga ole talosaga talafeagai.
O le faʻamatalaga autu o loʻo faʻaogaina i lenei suʻesuʻega o loʻo faʻamatalaina i le vaega o Metotia, ma e mafai ona sii mai faʻamatalaga debug mai https://github.com/baffou/ i totonu o faleoloa nei: SLM_temperatureShaping, CGMprocess, ma CGM_magicWandSegmentation.
Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK Faʻamatalaga i thermophiles ma a latou faʻaoga lautele. Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK Faʻamatalaga i thermophiles ma a latou faʻaoga lautele.Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. ma Sharma, AK Vaʻaiga lautele o thermophiles ma la latou faʻaoga lautele. Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK 深入了解嗜热菌及其广谱应用。 Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK.Mehta R., Singhal P., Singh H., Damle D. ma Sharma AK O se malamalama loloto i thermophiles ma le tele o faʻaoga.3 Biotechnology 6, 81 (2016).


Taimi meli: Sep-26-2022